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細菌新型生化鑒定管使用說(shuō)明
―― 071840 綠膿桿菌生化鑒定盒(5種×10次)
一)生化管的使用方法
開(kāi)啟西林瓶前,用75%酒精棉消毒西林瓶表面,在無(wú)菌條件下,按鋁蓋上的箭頭方向打開(kāi)鋁蓋,撕開(kāi)鋁蓋,打開(kāi)西林瓶膠塞(如圖1)所有的西林瓶在使用后均高壓滅菌后方可棄去。
二)綠膿桿菌生化鑒定盒的詳細使用方法
綠膿桿菌為革蘭氏陰性桿菌,氧化酶陽(yáng)性,能產(chǎn)生綠膿菌素、液化明膠,還原硝酸鹽和在42℃條件下生長(cháng)的一類(lèi)致病菌。
從分離培養平板上挑取可疑菌苔接種于每種微量西林瓶?jì)取?u>將已接種的西林瓶再套上膠塞,一般采用全加塞(如圖2左兩瓶所示),特殊情況在下表注明采用半加塞(如圖2右兩瓶所示),直立于內托的凹槽內(如圖2),或放置于合適的瓶架中,于35-37℃培養箱中培養,結果觀(guān)察見(jiàn)表1。
注意事項:
1、如有特殊的接種方式、培養時(shí)間或培養方式,請詳見(jiàn)每種生化鑒定管附帶的使用說(shuō)明。
2、明膠的凝固點(diǎn)在28℃左右,受運輸過(guò)程的溫度及震蕩影響,含明膠的產(chǎn)品(明膠)有可能出現培養基在管壁凝固形成不規則狀,此為正?,F象,并非質(zhì)量問(wèn)題,使用前可用水浴或培養箱或其他方法溫育,使培養基呈液體流動(dòng)狀,擺直立即可。
表1各項生化管使用說(shuō)明 | ||||
產(chǎn)品名稱(chēng) | 結果判定 | 培養時(shí)間 (小時(shí)) | 使用說(shuō)明 | |
陽(yáng)性 | 陰性 | |||
綠膿色素 | 產(chǎn)生色素 | 不產(chǎn)生色素 | 22-26 | 西林瓶半加塞(如圖2右兩瓶所示)培養后加入氯仿約15~20滴,充分振蕩,陽(yáng)性者氯仿提取液呈藍色,再加入1mol/L鹽酸6~10滴,振蕩后靜置片刻,如上層鹽酸液呈粉紅色或紫紅色即為陽(yáng)性,表示有綠膿色素存在。 |
明膠 | 4-8℃呈液態(tài) | 4-8℃呈固態(tài) | 24-72 | 挑取新鮮菌苔穿刺接種,西林瓶半加塞(如圖2右兩瓶所示)后豎立培育,培養后置4-8℃冰箱30分鐘后觀(guān)察結果。如果24h不液化,則繼續培養到48h或72h再觀(guān)察。 |
硝酸鹽產(chǎn)氣 | 倒管內有氣泡 | 倒管內無(wú)氣泡 | 18-24 | 使用前確定倒管內無(wú)氣泡。 |
營(yíng)養瓊脂 | 生長(cháng) | 不生長(cháng) | 41~42℃,24~48 | 用接種針挑取新鮮菌苔,在斜面上劃“之”字形接種。 |
氧化酶試劑 | 藍紫色 | 不變色 | 30秒內 | 滴加1滴試劑到一小塊潔凈濾紙上,以剛剛浸濕為宜;用玻棒或接種環(huán)(鉑或塑料)挑取適量新鮮菌苔涂在紙片上。 |
備注:本鑒定盒是按照環(huán)凱產(chǎn)品目錄中的品種成份從左到右的順序擺放。 |
三)綠膿桿菌的生化鑒定程序(見(jiàn)下圖)和生化鑒定特征(見(jiàn)表2)